PCR em Tempo Real para Quantificação de Milho OGM – SureFood® GMO QUANT 35S Corn Art. No. S2020
O SureFood® GMO QUANT 35S Corn (S2020) é um teste de PCR em tempo real para quantificação relativa do promotor 35S CaMV em produtos contendo milho. O kit utiliza dois sistemas de PCR, um específico para a sequência 35S CaMV e outro para o gene de referência do milho, permitindo a determinação da proporção de material geneticamente modificado. Apresenta limite de detecção de aproximadamente 5 cópias de DNA, equivalente a cerca de 0,01% em grãos de milho não processados.
Uso pretendido
O teste foi desenvolvido para a estimativa relativa da quantidade de DNA 35S CaMV exclusivamente em produtos que contenham milho.
Para isso, o kit contém dois sistemas de PCR: um específico para a sequência promotora 35S CaMV e outro específico para milho, utilizado como gene de referência.
A detecção do promotor 35S CaMV está de acordo com o § 64 da Lei Alemã de Alimentos (LFGB).
Informações gerais
O ensaio de PCR em tempo real pode ser utilizado com equipamentos de PCR em tempo real já estabelecidos no mercado.
A verificação técnica dos equipamentos foi realizada nos seguintes sistemas:
- Roche LightCycler® 480 II
- Qiagen Rotor-Gene Q
- Bio-Rad CFX96 Dx
- Bio-Rad CFX96 Opus
- R-Biopharm RIDA®CYCLER
- Agilent AriaDx
Especificações
| Especificação | Informação |
| Art. nº | S2020 |
| Formato do teste | 2 × 50 reações, sendo 50 reações utilizadas para a quantificação do gene de referência. |
| Preparo da amostra | Para o preparo do DNA de matérias-primas, recomenda-se o uso do SureFood® PREP Basic (Art. nº S1052) ou do SureFast® Mag PREP Food (Art. nº F1060).
Para alimentos e rações altamente processados, recomenda-se o SureFood® PREP Advanced (Art. nº S1053). O SureFood® PREP Add On (Art. nº S1055) é destinado à extração de DNA de matérias-primas, bem como de alimentos e rações processados, utilizando amostras de 2 g. Ele é utilizado em conjunto com o SureFood® PREP Basic. |
| LOD – Limite de detecção | O PCR 35S Corn apresenta limite de detecção de aproximadamente 5 cópias de DNA, equivalente a cerca de 0,01% em grãos de milho não processados.
O limite de detecção do ensaio depende da matriz da amostra, do grau de processamento, do método de preparo do DNA e do teor de DNA. |
| LOQ – Limite de quantificação | O limite de quantificação depende da concentração do DNA da amostra utilizado na análise.
Por exemplo, se estiverem presentes 50.000 cópias da sequência-alvo do gene de referência específico para milho, o limite de quantificação relativa para DNA 35S Corn é de 0,1%. |
