RIDASCREEN® Gliadin competitive Art. No. R7021
O RIDASCREEN® Gliadin competitive (R7021) é um teste ELISA competitivo baseado no anticorpo R5 para análise quantitativa de glúten em alimentos fermentados e hidrolisados. Possui microplaca de 96 poços, incubação de 40 minutos e limite de quantificação de 5 mg/kg de gliadina ou 10 mg/kg de glúten.
Método especializado de teste ELISA (competitivo) para detecção de glúten em alimentos fermentados e hidrolisados!
Garante uma análise quantitativa segura de fragmentos peptídicos de prolaminas provenientes do trigo (gliadina), centeio (secalina) e cevada (hordeína) em alimentos fermentados ou hidrolisados declarados como “sem glúten”.
O RIDASCREEN® Gliadin competitive é um imunoensaio enzimático competitivo baseado no anticorpo R5, destinado à análise quantitativa de prolaminas do trigo (gliadina), centeio (secalina) e cevada (hordeína) em alimentos fermentados e hidrolisados.
O anticorpo monoclonal específico utilizado (R5) detecta sequências de aminoácidos presentes nas prolaminas que são tóxicas para pacientes com doença celíaca. No entanto, ele não reage com epítopos de prolaminas da aveia, que são toleradas pela maioria dos pacientes celíacos. Por isso, o método pode ser utilizado para detectar glúten de trigo, centeio e cevada em produtos à base de aveia destinados à rotulagem como “sem glúten”.
O ELISA R5 RIDASCREEN® Gliadin competitive é:
- método oficial de análise validado pela AOAC (AOAC-OMA), com status Final Action (2015.05);
- método oficial da AACCI (38-55.01) para cerveja, xarope de amido e massa fermentada;
- método validado pela ASBC (Beer-49).
Benefícios
- Quantifica prolaminas intactas e seus fragmentos potencialmente tóxicos (aproximadamente 10 aminoácidos).
- O kit utiliza o anticorpo R5 recomendado pelo Codex e é o único ELISA competitivo disponível comercialmente que utiliza o anticorpo R5.
Informações gerais
O uso de glúten em alimentos é extremamente comum devido aos seus efeitos funcionais, como melhoria da textura, retenção de umidade e sabor. Entretanto, distúrbios relacionados à intolerância ao glúten, como a doença celíaca, exigem uma dieta permanentemente livre de glúten para evitar manifestações clínicas.
De acordo com o Codex Alimentarius (CODEX STAN 118-1979), alimentos destinados a pessoas intolerantes ao glúten podem conter até 20 mg/kg de glúten, concentração considerada tolerável para pacientes celíacos. Alimentos contendo menos de 20 mg/kg de glúten podem ser rotulados como “sem glúten”.
O limite de 20 mg/kg foi adotado pelas legislações nacionais de diversos países.
O glúten do trigo, centeio e cevada é constituído por uma mistura de proteínas das classes prolaminas e glutelinas. As prolaminas do trigo são denominadas gliadinas. O conteúdo de prolaminas no glúten do trigo é definido como 50% (CODEX STAN 118-1979).
Por isso, os resultados obtidos por métodos ELISA baseados no anticorpo R5, calibrados em relação à gliadina — a fração prolamínica do glúten do trigo — devem ser multiplicados por um fator de 2 para calcular a concentração total de glúten.
Durante o processamento de alimentos, como em processos de fermentação ou hidrólise, as moléculas intactas de prolaminas são parcial ou completamente degradadas em pequenos fragmentos peptídicos.
Para pacientes com doença celíaca, esses fragmentos continuam sendo prejudiciais mesmo após a digestão no estômago.
Pequenas sequências peptídicas isoladas (motivos) não podem ser detectadas pelo formato ELISA sanduíche, pois são necessários pelo menos dois epítopos para a realização desse tipo de ensaio.
Entretanto, fragmentos peptídicos individuais podem ser detectados por meio de um formato competitivo, como o utilizado no RIDASCREEN® Gliadin competitive.
Mais informações sobre a fundamentação científica do sistema de teste podem ser encontradas nos seguintes documentos:
- AOECS (Association of European Coeliac Societies) recomenda o ELISA R5, no formato competitivo, para a análise de glúten hidrolisado. Ver mais
- AACI. Ver mais
- “A comparison of gluten levels in labeled gluten-free and certified gluten-free foods sold in the United States” (T. Thompson, S. Simpson), publicado no European Journal of Clinical Nutrition (2014).
As seguintes soluções de extração são validadas para este método:
- Etanol a 60%
Especificações técnicas
- Código do produto: R7021
- Formato do teste: Microplaca com 96 poços – 12 tiras com 8 poços removíveis cada
- Preparo da amostra: Homogeneização e extração
- Tempo de incubação: 40 minutos em temperatura ambiente
- Limite de detecção (LOD): 2,3 mg/kg (ppm) de gliadina, equivalente a 4,6 mg/kg (ppm) de glúten
- Faixa de LOD conforme a matriz: 1,9 a 2,6 mg/kg (ppm) de gliadina
- Limite de quantificação (LOQ): 5 mg/kg (ppm) de gliadina ou 10 mg/kg (ppm) de glúten
- Avaliação: Espectrofotômetro para microplacas a 450 nm
Matrizes validadas
O método foi validado para diferentes matrizes, incluindo:
- Cerveja sem glúten
- Cerveja de arroz
- Farinha de milho
- Massa fermentada (sourdough)
- Xarope de beterraba açucareira
Analito detectado
O anticorpo monoclonal R5 reconhece principalmente a sequência de aminoácidos QQPFP, presente em diversas sequências de prolaminas relacionadas à doença celíaca.
Essa sequência ocorre repetidamente nas prolaminas provenientes de trigo, centeio e cevada, permitindo sua detecção em alimentos processados, fermentados ou hidrolisados.
Aplicações
O RIDASCREEN® Gliadin competitive pode ser utilizado em aplicações como:
- Determinação quantitativa de glúten em alimentos fermentados e hidrolisados
- Análise de cervejas e outros produtos fermentados
- Controle de produtos destinados à rotulagem “sem glúten”
- Análise de glúten em enzimas suplementares
Também está disponível uma aplicação para ampliação da faixa de quantificação até 2,5 mg/kg (ppm) de gliadina.
Métodos e certificações
O RIDASCREEN® Gliadin competitive possui reconhecimento por importantes métodos analíticos internacionais:
- AOAC Official Method of Analysis – OMA 2015.05
- AACCI Approved Method 38-55.01
- ASBC Methods of Analysis – Beer-49
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